Ċentrifuga ta 'veloċità baxxa
Deskrizzjoni
Parametri tekniċi
A Ċentrifuga b'veloċità baxxaspins biex toħloq forza ċentrifugali li tifred il-komponenti ta 'densitajiet differenti f'kampjun. Matul is-separazzjoni taċ-ċelluli, ċelloli, frammenti taċ-ċelloli, u bijomolekuli oħra huma separati f'postijiet differenti permezz ta 'forza ċentrifugali, skont il-massa u d-densità tagħhom. Speċifikament, meta t-tubu tal-kampjun ikun imdawwar b'veloċità għolja ġewwa r-rotor ċentrifuga, il-forza ċentrifugali fuq il-komponenti differenti tat-taħlita hija proporzjonali għall-massa tagħhom, u hija affettwata wkoll mill-veloċità u r-raġġ tar-rotazzjoni. Ċelloli jew partiċelli akbar huma mitfugħa lejn il-qiegħ tat-tubu taċ-ċentrifuga, filwaqt li komponenti iżgħar jibqgħu fis-saff ta 'fuq. Dan il-prinċipju ta 'separazzjoni bbażat fuq id-densità u l-massa jagħmel ċentrifugi b'veloċità baxxa għodda ideali għas-separazzjoni taċ-ċelluli.
Proċedura ta 'ċentrifuga ta' veloċità baxxa fis-separazzjoni taċ-ċelluli
| ◇Preparazzjoni tal-kampjun: L-ewwel, għandek bżonn tħejji l-kampjun taċ-ċellula biex tkun separat. Dan ġeneralment jinkludi kulturi taċ-ċelloli, kampjuni tad-demm, jew kampjuni bijoloġiċi oħra li fihom ċelloli. Tiżgura li l-kampjun ikun ġie trattat sew qabel iċ-ċentrifugazzjoni, bħal dilwizzjoni, diġestjoni jew filtrazzjoni. ◇ Agħżel it-tubu taċ-ċentrifuga t-tajba: Agħżel it-tubu taċ-ċentrifuga t-tajba skont il-volum tal-kampjun u l-forza ċentrifugali meħtieġa.Ċentrifuga ta 'veloċità baxxaS normalment jappoġġjaw varjetà ta 'tubi ta' ċentrifuga, bħal 15ml, 50ml jew 100ml. Tiżgura li t-tubu ċentrifugali huwa ta 'kwalità tajba u ssiġillat biex tevita tnixxija matul il-proċess ċentrifugali. ◇Ibbilanċja kampjuni: Qabel ma tpoġġi kampjuni fiċ-ċentrifuga, trid tiżgura li l-kampjuni fit-tubi kollha ta 'ċentrifuga huma ta' massa ugwali jew simili. Dan jista 'jsir billi tiżen il-massa tal-kampjun f'kull tubu ta' ċentrifuga. Bilanċ tal-kampjun huwa essenzjali biex jipprevjeni li ċ-ċentrifuga tiġġenera vibrazzjoni u ħoss waqt l-operazzjoni. |
|
|
|
◇ Issettja parametri ċentrifugali: Skond ir-rekwiżiti sperimentali, issettja l-veloċità u l-ħin ċentrifugali xierqa. Il-firxa tal-veloċità ta 'ċentrifugi b'veloċità baxxa hija ġeneralment bejn 300rpm u 10, 000 rpm, u l-ħin jista' jiġi aġġustat skond it-tip ta 'kampjun u l-effett ta' separazzjoni mixtieq. ◇ Ibda ċ-ċentrifuga: Poġġi t-tubu taċ-ċentrifuga bilanċjat fir-rotor taċ-ċentrifuga u agħlaq il-qoxra taċ-ċentrifuga. Imbagħad ibda ċ-ċentrifuga u ċ-ċentrifuga skont il-parametri stabbiliti. Matul il-proċess ta 'ċentrifuga, oqgħod attent għall-istat tat-tmexxija taċ-ċentrifuga biex tiżgura li ma jkun hemm l-ebda vibrazzjoni jew ħoss anormali. ◇ Iġbor u tipproċessa l-kampjuni wara s-separazzjoni: Wara ċentrifugazzjoni, għalaq iċ-ċentrifuga u stenna li tieqaf kompletament. It-tubu taċ-ċentrifuga mbagħad jitneħħa bir-reqqa u s-supernatant u l-preċipitat taċ-ċellula jinġabru f'kontenituri separati bl-użu ta 'għodda xierqa, bħal pipetta. Skont il-bżonnijiet ta 'l-esperiment, il-preċipitazzjoni taċ-ċellula tista' tiġi mnaddfa, ikkultivata jew analizzata aktar. |
Konsiderazzjonijiet ta 'ċentrifuga ta' veloċità baxxa fis-separazzjoni taċ-ċelluli
● L-għażla tal-veloċità u l-ħin ċentrifugali t-tajba: L-għażla tal-veloċità u l-ħin hija kruċjali għall-effikaċja tas-separazzjoni taċ-ċelluli. Veloċità ta 'rotazzjoni għolja wisq tista' twassal għal ksur jew ħsara taċ-ċelloli, filwaqt li żmien twil wisq jista 'jwassal għal aggregazzjoni taċ-ċelluli jew preċipitazzjoni mhux kompluta. Għalhekk, l-għażla tal-parametri ċentrifugali għandha titqies skont it-tip, id-daqs u d-densità taċ-ċelloli.
● Tiżgura bilanċ tal-kampjun: Il-bilanċ tal-kampjun huwa ċ-ċavetta biex tipprevjeni ċ-ċentrifuga milli tiġġenera vibrazzjoni u ħoss waqt l-operazzjoni. Meta tpoġġi kampjuni, huwa meħtieġ li jiġi żgurat li l-kampjuni fit-tubi kollha ta 'ċentrifuga huma ta' massa ugwali jew simili. Jekk hemm differenza kbira fil-kwalità tal-kampjun, ammont xieraq ta 'buffer jew melħ normali jista' jiżdied mat-tubu taċ-ċentrifuga eħfef biex jinkiseb bilanċ.
● Agħżel it-tubu taċ-ċentrifuga t-tajba: Il-kwalità u l-issikkar tat-tubu taċ-ċentrifuga għandhom ukoll impatt importanti fuq l-effikaċja tas-separazzjoni taċ-ċelluli. Tubi ċentrifugali ta 'kwalità għolja għandhom ir-reżistenza tajba għas-siġillar u l-korrużjoni, li jistgħu jipprevjenu b'mod effettiv it-tnixxija tal-kampjun u l-kontaminazzjoni. Fl-istess ħin, l-ispeċifikazzjoni tat-tubu ċentrifugali teħtieġ ukoll li tintgħażel skont il-volum tal-kampjun u l-forza ċentrifugali meħtieġa.
● Oqgħod attent għall-manutenzjoni u l-manutenzjoni taċ-ċentrifuga: Naddaf regolarment il-kamra ċentrifugali u r-rotor taċ-ċentrifuga biex tevita kontaminazzjoni residwa tal-kampjun. Imsaħ nadif fil-ħin wara l-użu biex tevita l-korrużjoni kkawżata minn residwu likwidu. Fl-istess ħin, huwa wkoll meħtieġ li tiċċekkja regolarment il-korda tal-enerġija u l-plagg u komponenti oħra taċ-ċentrifuga biex tiżgura li huma intatti u jevitaw il-perikli tas-sigurtà.
Applikazzjoni ta 'Ċentrifuga ta' Veloċità Baxxa fil-Bijoteknoloġija
● Trattament taċ-ċelloli fl-inġinerija ġenetika: Fl-inġinerija ġenetika, iċ-ċelloli spiss jeħtieġu jkunu kkultivati, trasfettati, skrinjati u trattamenti oħra. Ċentrifugi b'veloċità baxxa jistgħu jintużaw għal passi bħall-konċentrazzjoni u l-ħasil ta 'sospensjonijiet taċ-ċelluli, kif ukoll għall-ġbir ta' ċelloli wara t-trasfezzjoni. Permezz ta 'ċentrifugazzjoni, impuritajiet u ċelloli mhux trasfettati fil-mezz tal-kultura taċ-ċelluli jistgħu jitneħħew, u l-effiċjenza u l-purità tat-trasfezzjoni tal-ġeni jistgħu jitjiebu.
● Purifikazzjoni u iżolament tal-proteina: Fir-riċerka tal-proteini, il-proteini speċifiċi għandhom jiġu ppurifikati minn kampjuni bijoloġiċi kumplessi. Ċentrifugi b'veloċità baxxa jistgħu jintużaw għal kjarifika inizjali ta 'soluzzjonijiet ta' proteina u tneħħija ta 'impuritajiet, bħal fdalijiet taċ-ċelluli, aċidi nuklejiċi, eċċ. Permezz ta' trattament ċentrifugali, tista 'tinkiseb soluzzjoni ta' proteina relattivament pura, li tipprovdi l-bażi għal passi ta 'purifikazzjoni sussegwenti.
● Iżolament u purifikazzjoni ta 'partiċelli tal-virus: Il-partiċelli tal-virus ġeneralment ikollhom densità u daqs speċifiku u jistgħu jiġu separati u ppurifikati minn ċentrifugi ta 'veloċità baxxa. Pereżempju, fir-riċerka tal-viroloġija, partiċelli virali jistgħu jiġu separati mill-kulturi taċ-ċelloli bl-użu ta 'ċentrifugazzjoni differenzjali. Dan il-metodu jieħu vantaġġ mid-differenzi fil-forzi ċentrifugali b'veloċità differenti biex jisseparaw partiċelli virali minn komponenti ċellulari oħra.
● Produzzjoni u Kontroll tal-Kwalità ta 'Drogi Bijoloġiċi: Fil-proċess ta 'produzzjoni ta' mediċini bijoloġiċi, ċentrifugi b'veloċità baxxa ħafna drabi jintużaw għall-kjarifika tal-fluwidu tal-kultura taċ-ċelluli, it-tneħħija tal-fdalijiet taċ-ċelluli, u s-separazzjoni inizjali tal-prodotti tad-droga. Barra minn hekk, fil-kontroll tal-kwalità tal-mediċini, ċentrifugi b'veloċità baxxa jistgħu jintużaw ukoll biex jindividwaw indikaturi ewlenin bħad-distribuzzjoni tad-daqs u l-istabbiltà tal-partiċelli tal-mediċina.
Applikazzjoni ta 'ċentrifuga ta' veloċità baxxa fis-separazzjoni tal-partiċelli tal-virus
◇ Separazzjoni primarja: Ċentrifugi ta 'veloċità baxxa ħafna drabi jintużaw għas-separazzjoni primarja tal-partiċelli tal-virus. Fil-proċess ta 'estrazzjoni tal-virus, partiċelli kbar bħal frammenti taċ-ċelluli u impuritajiet jistgħu jitneħħew permezz ta' ċentrifugazzjoni ta 'veloċità baxxa, u jista' jinkiseb sospensjoni ta 'virus relattivament pur. Dan il-pass jiffaċilita l-passi ta 'purifikazzjoni sussegwenti.
◇ Arrikkiment tal-virus: F'xi każijiet, ċentrifugi b'veloċità baxxa jistgħu jintużaw ukoll għall-arrikkiment tal-virus. Bl-aġġustament tal-ħin u l-veloċità taċ-ċentrifuga, il-partiċelli tal-virus jistgħu jiġu depożitati fil-qiegħ tat-tubu taċ-ċentrifuga, sabiex il-kampjun tal-virus ikkonċentrat jista 'jinkiseb billi jiġi estratt is-supernatant. Madankollu, għandu jkun innutat li l-effett ta 'arrikkiment ta' ċentrifugi ta 'veloċità baxxa huwa relattivament limitat, u għal okkażjonijiet fejn huma meħtieġa viruses ta' purità għolja, huma ġeneralment meħtieġa metodi oħra ta 'purifikazzjoni.

Flimkien ma 'metodi oħra ta' purifikazzjoni
● Metodu ċentrifugali differenzjali: Metodu ċentrifugali differenzjali huwa metodu biex jinfedew partiċelli ta 'daqsijiet u densitajiet differenti bl-użu ta' veloċitajiet differenti u ħinijiet ċentrifugali. Ċentrifugazzjoni differenzjali ħafna drabi tintuża biex tkompli tneħħi l-impuritajiet u tikkonċentra l-virus waqt il-purifikazzjoni tal-virus. Wara li jitneħħew partiċelli kbar bħal organelli permezz ta 'ċentrifugazzjoni ta' veloċità baxxa, il-partiċelli tal-virus huma preċipitati permezz ta 'ċentrifugazzjoni ta' veloċità għolja.
● Metodu ta 'ċentrifugazzjoni tal-gradjent tad-densità: Il-metodu ta 'ċentrifugazzjoni tal-gradjent tad-densità huwa l-użu ta' midja ta 'densitajiet differenti biex jifforma gradjent, sabiex partiċelli ta' densitajiet differenti jissetiljaw f'pożizzjonijiet differenti fil-metodu tal-gradjent. Fil-purifikazzjoni tal-virus, ċentrifugazzjoni tal-gradjent tad-densità ħafna drabi tintuża biex tissepara partiċelli tal-virus minn impuritajiet oħra ta 'densità simili (bħal proteini, aċidi nuklejiċi, eċċ.). Billi tħejji l-gradjent tad-densità fit-tubu taċ-ċentrifuga bil-quddiem, u mbagħad iżżid is-sospensjoni tal-virus fuq il-wiċċ tal-gradjent għal ċentrifugazzjoni, il-partiċelli tal-virus joqgħodu f'pożizzjoni speċifika fil-gradjent biex jiffurmaw żona ta 'sedimentazzjoni.
● Metodu ta 'preċipitazzjoni: Il-metodu ta 'preċipitazzjoni huwa li tippreċipita l-partiċelli tal-virus billi żżid reaġenti kimiċi. Aġenti ta 'preċipitazzjoni komuni jinkludu sulfat ta' l-ammonju, polyethylene glycol (PEG), eċċ. Il-metodu ta 'preċipitazzjoni jista' jintuża għal aktar purifikazzjoni tal-virus. Billi taġġusta l-konċentrazzjoni u l-valur tal-pH tal-preċipitatur, il-partiċelli tal-virus jistgħu jiġu preċipitati b'mod selettiv biex jitneħħew l-impuritajiet.
● Metodu ta 'filtrazzjoni: Il-metodu tal-filtrazzjoni huwa metodu biex jinfedew partiċelli tal-virus minn impuritajiet oħra permezz ta 'kolonna tal-kromatografija tal-filtrazzjoni tal-ġel. Il-kolonna kromatografika tal-filtru tal-ġel hija separata skont id-daqs tal-partikula, u l-molekuli kbar joħorġu mill-kolonna kromatografika l-ewwel, u l-molekuli żgħar joħorġu aktar tard. Billi tagħżel kundizzjonijiet xierqa tal-ġel u kromatografiċi, il-partiċelli tal-virus jistgħu jiġu separati b'mod effettiv minn impuritajiet oħra.
● Metodu elettroforetiku: Il-metodu elettroforetiku huwa l-użu ta 'azzjoni tal-kamp elettriku biex isiru partiċelli ċċarġjati fil-metodu ta' migrazzjoni tal-kamp elettriku. Fil-purifikazzjoni tal-virus, l-elettroforeżi ħafna drabi tintuża biex tissepara partiċelli virali minn impuritajiet oħra ċċarġjati. Is-separazzjoni effiċjenti u l-purifikazzjoni tal-partiċelli tal-virus jistgħu jinkisbu billi jintgħażlu kundizzjonijiet ta 'elettroforeżi xierqa u midja.
It-tags Popolari: Ċentrifuga ta 'veloċità baxxa, kina manifatturi ta' ċentrifuga ta 'veloċità baxxa, fornituri, fabbrika
Par ta ' l-
Lab Three Roll MillLi jmiss
Magna taċ-Ċentrifuga tal-LabIbgħat l-inkjesta













