Kromatografija tal-kolonna b'lura
2. kolonna kromatografika (tip ta 'rotazzjoni)
3. kolonna kromatografika (manwal)
*** Lista tal-prezzijiet għal kollox hawn fuq, staqsina biex niksbu
Deskrizzjoni
Parametri tekniċi
Kromatografija tal-kolonna b'lura, magħrufa wkoll bħala l-kromatografija tal-fażi maqluba, hija teknika impjegata ħafna fil-kimika analitika u prepattiva, partikolarment fil-qasam tal-bijokimika u l-proteomiċi . Dan il-metodu juża fażi stazzjonarja bi gel mhux polari jew idrofobiku, bħal ktajjen alkil (komunement C8, C18) marbuta ma 'gel tas-silika Ibbażati fuq l-ilma b'modifikaturi organiċi bħal acetonitrile jew metanol .
Il-prinċipju ta 'separazzjoni jiddependi fuq is-solubilità differenzjali ta' l-analiti bejn il-fażijiet mobbli u stazzjonarji . hekk kif il-kompożizzjoni tal-fażi mobbli gradwalment issir aktar organika, l-analiti b'idrofobiċità ogħla jinteraġixxu b'mod aktar qawwi mal-fażi stazzjonarja, li jwassal għal infużjoni mdewwma meta mqabbla ma 'komposti aktar polari . din is-separazzjoni bbażata fuq l-affinità hija effettiva ħafna għal moleculi Polaritajiet, li jagħmluha indispensabbli għall-purifikazzjoni tal-proteini, peptidi, u bijomolekuli oħra .
Parametri



Applikazzjonijiet
Bijoloġija
Il-kromatografija tal-fażi inversa (RPC) hija metodu effettiv ħafna għas-separazzjoni ta 'taħlitiet kumplessi ta' proteini, bħal serum . It-teknika tħaddem in-natura mhux polari tal-fażi stazzjonarja u n-natura polari tal-fażi mobbli biex tinkiseb separazzjoni bbażata fuq l-interazzjonijiet idrofobiċi bejn il-proteini u l-fażi stazzjonarja .
L-effiċjenza għolja u s-selettività ta 'RPC joħorġu mill-abbiltà tagħha li ssolvi proteini b'differenzi sottili fil-proprjetajiet idrofobiċi tagħhom . Dan jagħmilha għażla ideali għall-iżolament u l-purifikazzjoni ta' proteini speċifiċi minn kampjuni bijoloġiċi, fejn il-purità u r-rendiment huma kritiċi .
Fil-kuntest tas-separazzjoni tas-serum, RPC jista 'jintuża biex jissepara proteini individwali jew frazzjonijiet ta' proteini bbażati fuq l-affinità li torbot tagħhom mal-fażi stazzjonarja . billi jintgħażlu bir-reqqa l-kompożizzjoni tal-fażi mobbli u r-rata tal-fluss, ir-riċerkaturi jistgħu jfasslu s-separazzjoni tal-kundizzjonijiet biex jottimizzaw is-separazzjoni tal-proteini fil-mira filwaqt li jimminimizzaw l-elużjoni tal-ko-elużjoni tal-kontamaninti .}}}}}}}}
L-RPC joffri wkoll il-vantaġġ li jkun skalabbli, li jagħmilha adatta kemm għall-purifikazzjoni tal-proteina fuq skala tal-laboratorju kif ukoll għall-proċessi ta 'produzzjoni fuq skala akbar . Barra minn hekk, il-kolonni RPC jistgħu jerġgħu jintużaw mill-ġdid u jiġu riġenerati, li jnaqqsu l-ispejjeż u l-iskart .
Fil-qosor, RPC hija għodda qawwija għas-separazzjoni ta 'taħlitiet ta' proteini kumplessi, bħas-serum, u l-effiċjenza u s-selettività għolja tagħha jagħmluha għażla eċċellenti għall-iżolament u l-purifikazzjoni ta 'proteini speċifiċi minn kampjuni bijoloġiċi .
Industrija Farmaċewtika
Il-kromatografija tal-fażi inversa (RPC) għandha rwol ċentrali fl-industrija farmaċewtika, partikolarment fis-separazzjoni u l-purifikazzjoni tad-drogi, inklużi mediċini kontra l-kanċer u antibijotiċi {.
Il-purità u l-kwalità tal-mediċini huma tal-akbar importanza għall-effikaċja u s-sigurtà tagħhom . RPC joffri metodu effiċjenti ħafna u selettiv għall-iżolament u l-purifikazzjoni tal-mediċini minn taħlitiet kumplessi, li jiżgura li l-prodott finali jissodisfa standards ta 'kwalità rigorużi .
RPC jaħdem billi juża d-differenzi fl-interazzjonijiet idrofobiċi bejn il-molekuli tal-mediċina u l-fażi stazzjonarja . billi taġġusta l-kompożizzjoni tal-fażi mobbli u r-rata tal-fluss, ir-riċerkaturi jistgħu jfasslu l-kundizzjonijiet ta 'separazzjoni biex jimmassimizzaw il-purità u r-rendiment tal-mediċina fil-mira filwaqt li jimminimizzaw il-kontaminazzjoni.}}
Fil-każ ta 'mediċini kontra l-kanċer u antibijotiċi, l-RPC hija partikolarment ta' valur minħabba li dawn il-mediċini spiss ikollhom twieqi terapewtiċi dojoq u huma sensittivi ħafna għall-impuritajiet . l-abilità ta 'RPC li tikseb livelli għoljin ta' purità u selettività tagħmilha għażla ideali biex tiżgura l-kwalità u s-sigurtà ta 'dawn il-mediċini kritiċi .
Barra minn hekk, l-RPC hija kompatibbli ma 'firxa wiesgħa ta' solventi u fażijiet wieqfa, li tippermetti flessibilità fl-ottimizzazzjoni ta 'kundizzjonijiet ta' separazzjoni għal mediċini differenti . Dan jagħmel RPC għodda versatili u affidabbli għall-purifikazzjoni tal-mediċina fl-industrija farmaċewtika .
Fil-qosor, RPC hija teknika essenzjali fl-industrija farmaċewtika għas-separazzjoni u l-purifikazzjoni tal-mediċini, inklużi mediċini kontra l-kanċer u antibijotiċi . l-abbiltà tagħha li tiżgura l-purità u l-kwalità ta 'dawn il-mediċini hija kruċjali għall-effikaċja u s-sigurtà tagħhom .
|
|
|
Analiżi tal-ikel
Il-kromatografija tal-fażi inversa (RPC) hija teknika siewja fl-analiżi tal-ikel għas-separazzjoni u l-analiżi tal-komposti b'idrofobiċitajiet differenti, bħal proteini, zokkor, u lipidi {.
Fl-industrija tal-ikel, il-fehim tal-kompożizzjoni tal-kampjuni tal-ikel huwa kritiku għall-kontroll tal-kwalità, it-tikkettar nutrittiv, u l-iżgurar tal-konformità mal-istandards regolatorji . RPC jipprovdi mezz effettiv ħafna biex tissepara u tikkwantifika dawn il-komponenti, li tippermetti analiżi preċiża u affidabbli .
L-RPC jaħdem billi jisfrutta d-differenzi fl-interazzjonijiet idrofobiċi bejn l-analiti u l-fażi wieqfa . billi tagħżel bir-reqqa l-kompożizzjoni tal-fażi mobbli u r-rata tal-fluss, ir-riċerkaturi jistgħu jfasslu l-kundizzjonijiet ta 'separazzjoni biex jottimizzaw is-separazzjoni tal-komposti fil-mira filwaqt li jimminimizzaw l-interferenza minn komponenti oħra fil-kampjun .
Pereżempju, fil-każ ta 'proteini, zokkor, u lipidi, RPC jista' jintuża biex jissepara u jikkwantifika dawn il-komposti bbażati fuq l-idrofobiċità relattiva tagħhom . Din l-informazzjoni hija kruċjali għall-valutazzjoni tal-kontenut nutrittiv tal-kampjuni tal-ikel u tiżgura li t-tikkettar nutrittiv huwa preċiż .
L-RPC huwa wkoll partikolarment utli għall-iskoperta ta 'kontaminanti jew adulteranti f'kampjuni ta' l-ikel . billi jissepara u janalizza l-komponenti ta 'kampjun ta' l-ikel, RPC jista 'jgħin biex tidentifika l-preżenza ta' sustanzi mhux mixtieqa, bħal pestiċidi, metalli tqal, jew addittivi mhux awtorizzati .
Fil-qosor, RPC hija għodda qawwija fl-analiżi tal-ikel għas-separazzjoni u l-analiżi tal-komposti b'idrofobiċitajiet differenti, bħal proteini, zokkor, u lipidi . il-kapaċità tagħha li tipprovdi informazzjoni preċiża u affidabbli dwar il-kompożizzjoni tal-kampjuni tal-ikel hija essenzjali għall-kontroll tal-ikel, it-tikkettar nutrizzjonali, u l-iżgurar
Kimika
Kromatografija tal-kolonna b'lurahija teknika versatili li ssib applikazzjonijiet fis-separazzjoni ta 'diversi komposti kimiċi, partikolarment dawk b'polaritajiet differenti .
L-RPC jaħdem billi jisfrutta d-differenzi fl-interazzjonijiet idrofobiċi bejn l-analiti u l-fażi wieqfa . Dan jagħmilha partikolarment effettiva għas-separazzjoni ta 'komposti ma' polaritajiet differenti, peress li dawn id-differenzi fil-polarità jistgħu jwasslu għal differenzi sinifikanti fl-interazzjonijiet idrofobiċi .
Wieħed mill-vantaġġi ewlenin ta 'RPC huwa l-abbiltà tiegħu li jimmaniġġa firxa wiesgħa ta' solventi u kundizzjonijiet . Din il-versatilità tippermetti lir-riċerkaturi jottimizzaw il-kundizzjonijiet ta 'separazzjoni għal komposti kimiċi differenti, li jiżguraw li s-separazzjoni hija kemm effiċjenti u effettiva .
Pereżempju, RPC jista 'jintuża biex jissepara komposti bbażati fuq is-solubilità tagħhom f'solventi differenti, il-piż molekulari tagħhom, jew l-istruttura kimika tagħhom . billi tagħżel bir-reqqa l-kompożizzjoni tal-fażi mobbli, ir-rata tal-fluss, u l-fażi stazzjonarja, ir-riċerkaturi jistgħu jfasslu s-separazzjoni tal-kundizzjonijiet biex jimmassimizzaw is-separazzjoni tal-komponenti fil-mira filwaqt li jimminimizzaw l-interferenza oħra fil-kampjun ieħor fil-kampjun {} 1}}}
L-RPC huwa wkoll adattabbli ħafna għall-użu ma 'metodi ta' skoperta differenti, bħal spettroskopija UV-vis, spettrometrija tal-massa, jew sejbien ta 'indiċi refrattiv . Dan jippermetti l-iskoperta sensittiva u selettiva ta' komposti fil-mira, anke f'konċentrazzjonijiet baxxi {.
Fil-qosor, RPC hija teknika versatili għas-separazzjoni ta 'diversi komposti kimiċi, partikolarment dawk b'polaritajiet differenti . il-kapaċità tagħha li timmaniġġa firxa wiesgħa ta' solventi u kundizzjonijiet, flimkien mal-kompatibilità tagħha ma 'metodi ta' skoperta differenti, tagħmilha għodda qawwija għal separazzjonijiet kimiċi differenti .
Effett tal-għażla tas-solvent
FiKromatografija tal-kolonna b'lura, L-għażla tas-solvent hija pass kruċjali, li għandu impatt sinifikanti fuq l-effiċjenza tas-separazzjoni, il-forma tal-quċċata, is-sensittività tal-iskoperta, u l-ħajja tal-kolonna kromatografika {.
Impatt fuq l-effett ta 'separazzjoni

Tipi u selettività tas-solventi
Tipi differenti ta 'solventi għandhom proprjetajiet kimiċi differenti, li jaffettwaw l-interazzjoni tagħhom mal-komponenti varji fil-kampjun, u b'hekk jinbidlu s-selettività tas-separazzjoni . pereżempju, meta tanalizzaw l-aċidu meta u para ta' 4 - (chloromethyl) benzoic acid u 3 - (chloromyl miksuba inizjalment bl-użu tas-sistema acetonitrile . Madankollu, wara li tissostitwixxi acetonitrile bil-metanol, il-forom tal-quċċata taż-żewġ miri kienu tajbin u separazzjoni kompluta tista 'tinkiseb {. Dan jindika li l-bidla fit-tip ta' solvent tista 'taffettwa b'mod sinifikanti s-selezzjonijiet tas-separazzjoni . għal xi wħud Tipi, jistgħu jinstabu kundizzjonijiet ta 'separazzjoni aktar xierqa .
Saħħa u riżoluzzjoni tas-solvent
Is-saħħa tas-solvent tirreferi għall-abbiltà ta 'solvent li joħroġ kampjun minn kolonna kromatografika . billi taġġusta l-intensità tas-solvent, il-ħin ta' żamma ta 'kull komponent fil-kampjun jista' jinbidel, u b'hekk jaffettwa r-riżoluzzjoni . fil-kromatografija organika maqsuma, is-solventi organiċi komuni bħal dawn bħala eluzzjonijiet differenti. Intensitajiet . L-abilità ta 'elużjoni ta' acetonitrile hija kemmxejn aktar b'saħħitha minn dik tal-metanol . meta mħallta ma 'l-ilma fl-istess proporzjon, jista' jelenka l-kampjun b'mod aktar effettiv . Skond l-ekwazzjoni ta 'riżoluzzjoni, li żżid il-koeffiċjent tas-solvent tista' żżid ir-riżoluzzjoni r, filwaqt li l-bidla fis-saħħa tas-solvent se taffettwa r-riżoluzzjoni ta 'l-għażla. effett .

Impatt fuq il-forma tal-quċċata
Intensità anormali ta 'elużjoni tas-solvent u forma tal-quċċata
L-intensità tal-elużjoni tas-solvent tal-kampjun għandha influwenza importanti fuq il-forma tal-quċċata . meta solvent jew soluzzjoni b'intensità ta 'elużjoni sinifikament ogħla mill-fażi mobbli tintuża għad-dissoluzzjoni, ħafna drabi twassal għal problemi bħal tnaqqis fl-effiċjenza tal-kolonna, il-quċċata ta' quddiem, u l-qxur furketta fil-quċċata . għall-istanza, meta tanalizza metanol: ilma=40: 60. jekk il-chloramphenicol kien maħlul fil-metanol, l-għadd tal-pjanċi kien inqas minn 32, {000} / m ³ {. aktar tard, il-fażi mobbli kienet użata għad-dissoluzzjoni, u l-għadd tal-pjanċi tela 'sa 90, 000 / M Iż-żieda ta 'kampjun ta' elużjoni qawwi solvent lokalment iżżid l-intensità ta 'elużjoni tal-fażi mobbli, u tikkawża żamma inkonsistenti bejn partijiet ta' quddiem u ta 'wara ta' komponent wieħed (il-parti ta 'quddiem timxi aktar malajr u l-parti ta' wara timxi aktar bil-mod), li mbagħad twassal għal twessigħ reġjonali u taffettwa l-forma tal-quċċata .
Kompatibilità bejn is-solvent u l-fażi mobbli
Kompatibilità fqira bejn is-solvent u l-fażi mobbli tista 'twassal ukoll għal forom tal-quċċata anormali . jekk is-solvent użat għas-solut għandu kompatibilità ħażina mal-fażi mobbli, dan jaffettwa b'mod sinifikanti t-trasferiment tas-solut bejn is-solvent u l-fażi mobbli, u b'hekk jinfluwenza l-proċess ta' adsorbiment mill-fażi stazzjonarja {. perestan L-aċetat tal-etil, u l-benżin, li għandhom kompatibilità ħażina mal-fażi mobbli, huma użati bħala solventi tal-kampjun, is-solut jista 'jdawwal direttament is-solut, billi jinjora l-proċess inizjali taż-żamma tal-kromatografija . ladarba jiġi stabbilit l-ekwilibriju tad-distribuzzjoni tas-solvent, is-solut jista' jsir espansiv żżejjed jew saħansitra parzjalment jaħrab mill-kolonna kromatografika, li tirriżulta fil-peak abnormali. forom .
Impatt fuq is-sensittività tad-detezzjoni
Assorbiment ultravjola ta 'solventi
Il-karatteristiċi ta 'assorbiment ultravjola tas-solvent jaffettwaw is-sensittività tad-detezzjoni . fir-reġjun ultravjola, speċjalment ir-reġjun ultravjola' l bogħod (qrib 200 nm), l-assorbiment ta 'acetonitrile huwa ħafna inqas minn dak ta' metanol. taħt kundizzjonijiet isometriċi, l-impatt ta 'dan id-differenza jista' jkun ovvju Madankollu, jekk tintuża l-elużjoni tal-gradjent, id-drift tal-linja bażi kkawżata minn acetonitrile huwa ħafna iżgħar minn dak tal-metanol . Għalhekk, meta l-aċetonitrile jintuża bħala l-fażi mobbli, il-kromatogramma li tirriżulta mhix biss estetikament pjaċevoli iżda għandha wkoll limitu ta 'skoperta ferm aktar baxx għall-kampjun . għalhekk, meta tuża t-tuls ta' rikanali. Solventi b'tulijiet ta 'mewġ ultravjola aktar baxxi bħal acetonitrile għandhom jintgħażlu biex inaqqsu l-istorbju tal-linja bażi u jsaħħu s-sensittività tad-detezzjoni .
Purità tas-solvent
Il-purità tas-solvent għandha wkoll impatt fuq is-sensittività tal-iskoperta . solventi tal-grad kromatografiku għandhom jintużaw kemm jista 'jkun biex tnaqqas l-interferenza ta' impuritajiet fuq id-ditekter . impuritajiet f'solventi pur mhux kromatografiċi jistgħu jikkawżaw assorbiment fil-wavelength, li jiżdiedu l-istorbju ta 'sejbien u tnaqqas
Impatt fuq il-ħajja tal-kolonni kromatografiċi
Polarità tas-solvent
Il-polarità tas-solvent għandha ċerta influwenza fuq il-ħajja tal-kolonna kromatografika . sustanzi b'polarità qawwija bħall-metanol, l-ilma u l-aċidu aċetiku glaċjali jistgħu jagħmlu ħsara lill-kolonni ppakkjati bil-ġel tas-silika, filwaqt li sustanzi b'polarità baxxa bħal n-butanol u diklorometan jistgħu jagħmlu ħsara fil-kolonni tas-silikat kimikament { Jistgħu jagħmlu ħsara lill-kolonni kromatografiċi tar-reżina tal-iskambju tal-katjoni, u s-soluzzjonijiet aċidużi huma suxxettibbli li jagħmlu ħsara lill-kolonni tar-reżina tal-iskambju tal-anjoni . pereżempju, meta jintużaw materjali tal-ippakkjar ibbażati fuq il-fażi tas-silika, huwa essenzjali li tingħata attenzjoni lill-firxa tal-pH tal-fażi mobbli . ġeneralment, il-firxa tal-ph tal-kolonni C18 hija bejn 2 u8.}}}}} 2, dan iwassal għall-idroliżi tal-fażi marbuta . Meta l-valur tal-pH huwa akbar minn 7, il-ġel tas-silika huwa suxxettibbli għal dissoluzzjoni . Użu frekwenti ta 'soluzzjoni buffer fażi stazzjonarja teħtieġ degradazzjoni .
Purità u impuritajiet tas-solvent
Il-partiċelli ta 'impurità li ma jinħallu użat u ffiltrat qabel l-użu .
It-tags Popolari: Kromatografija tal-kolonna b'lura, kina manifatturi tal-kromatografija b'lura tal-kolonna, fornituri, fabbrika
Par ta ' l-
Kolonna tal-gwardja fil-kromatografijaLi jmiss
Kromatografija bil-kolonna bil-vakwuIbgħat l-inkjesta













