Applikazzjoni ta 'Analiżi HPLC fl-Evaporatur Rotary

Il-kromatografija likwida ta 'prestazzjoni għolja (HPLC) tissejjaħ ukoll kromatografija likwida bi pressjoni għolja, kromatografija likwida b'veloċità għolja, kromatografija likwida b'riżoluzzjoni għolja u kromatografija moderna tal-kolonna. Hija teknoloġija ta 'separazzjoni analitika effiċjenti u mgħaġġla żviluppata malajr fis-snin 70, u hija mezz importanti ta' ttestjar modern ta 'separazzjoni.

Il-kromatografija likwida ta 'prestazzjoni għolja (HPLC) tuża likwidu bħala fażi mobbli, u tadotta sistema ta' infużjoni bi pressjoni għolja biex tippompja l-fażi mobbli bħal solvent wieħed b'polaritajiet differenti jew solvent imħallat u soluzzjoni buffer bi proporzjonijiet differenti fil-kolonna kromatografika b'fażi stazzjonarja. Wara li l-komponenti fil-kolonna jiġu separati, jidħlu fid-ditekter għall-iskoperta, sabiex jiġu realizzati l-analiżi tal-kampjun.

Il-mekkaniżmu ta 'separazzjoni tal-kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja huwa l-istess bħal dak tal-kromatografija tal-kolonna konvenzjonali, iżda l-ippakkjar huwa ifjen u jeħtieġ li jiġi mbuttat minn pompa ta 'pressjoni għolja, li għandha effiċjenza għolja fil-kolonna u veloċità ta' analiżi mgħaġġla. Differenti mill-kromatografija tal-gass, il-fażi mobbli fil-kromatografija likwida tipparteċipa wkoll fil-proċess ta 'separazzjoni tal-komponenti, u l-kompożizzjoni, il-proporzjon u l-valur tal-pH tagħha jistgħu jiġu aġġustati b'mod flessibbli, b'diversi modi ta' separazzjoni. Fil-prattika, il-valur taż-żamma u s-selettività tal-kampjuni fil-kolonna kromatografika huma aġġustati billi tinbidel il-kompożizzjoni tal-fażi mobbli, sabiex kampjuni differenti jkunu jistgħu jiġu sseparati.

 

Komponenti ta 'analiżi HPLC

 

Kolonna: Il-kolonna hija l-komponent ewlieni tas-sistema HPLC, li tintuża biex tissepara l-komposti fil-kampjun. Kolonni ta 'separazzjoni komuni jinkludu kolonna ta' fażi inversa, kolonna ta 'skambju joniku, kolonna ta' filtrazzjoni tal-ġel, eċċ., U l-għażla tagħhom tiddependi fuq il-proprjetajiet tal-kompost li jrid jiġi sseparat u l-iskop tal-analiżi.

Fażi mobbli: Fażi mobbli hija taħlita ta 'solventi użati fl-HPLC biex jgħaddi kampjun minn kolonna ta' separazzjoni. Il-fażi mobbli ġeneralment tikkonsisti f'taħlita ta 'solventi, li tista' tkun solvent wieħed jew taħlita ta 'solventi multipli f'ċertu proporzjon. L-għażla tal-fluss xieraq hija importanti ħafna għall-effett tas-separazzjoni.

Pompa: Il-pompa tintuża biex tipprovdi l-fażi mobbli u timbottaha permezz tal-kolonna tas-separazzjoni f'ċerta pressjoni. Pompi komuni jinkludu pompa ta 'pressjoni kostanti u pompa tal-gradjent. Il-pompa tal-gradjent tista 'tirrealizza bidla lineari jew mhux lineari tal-kompożizzjoni tal-fażi mobbli, sabiex tikseb effett ta' separazzjoni aħjar.

Injettur: L-injettur jintuża biex jintroduċi l-kampjun li għandu jiġi analizzat fis-sistema HPLC. Il-kampjun jista 'jkun siringa mħaddma manwalment jew kampjun awtomatiku. Normalment ikollhom il-karatteristiċi ta 'volum preċiż u ripetibbiltà tajba biex jiżguraw injezzjoni preċiża tal-kampjun.

Forn tal-Kolonna: Il-forn tal-kolonna jintuża biex jikkontrolla t-temperatura tal-kolonna tas-separazzjoni. Billi tikkontrolla t-temperatura, il-koeffiċjent tad-distribuzzjoni u l-veloċità tas-separazzjoni tal-kampjun fil-kolonna jistgħu jinbidlu, u b'hekk jiġi ottimizzat l-effett tas-separazzjoni.

Ditekter: Id-ditekter jintuża biex jikxef il-kompost separat u jiġġenera sinjal elettriku relatat mal-konċentrazzjoni tiegħu. Ditekters komuni jinkludu detector ta 'assorbiment ultravjola-viżibbli, detector tal-fluworexxenza u detector elettrokimiku. L-għażla tad-ditekter tiddependi fuq il-karatteristiċi tal-kompost li għandu jiġi analizzat u r-rekwiżiti tas-sensittività tal-kxif.

Sistema ta' Akkwist tad-Data: Is-sistema ta 'akkwist tad-dejta tintuża biex tirċievi, tirreġistra u tanalizza s-sinjali li joħorġu mid-ditekter. Jista 'jikkonverti s-sinjal misjub f'parametri bħall-ogħla żona u l-ħin ta' żamma, u jipprovdi analiżi u interpretazzjoni tar-riżultati.

 

Wara li s-solvent jitneħħa minnevaporatur li jdur, il-kampjun miksub huwa ġeneralment ikkonċentrat jew solidu. Jekk trid tanalizza aktar jew tiskopri l-komposti fil-kampjun, tista 'tanalizzahom permezz ta' kromatografija likwida ta 'prestazzjoni għolja (HPLC).

Passi ġenerali għall-analiżi tal-kampjuni wara l-evaporazzjoni rotatorja permezz tal-HPLC

 

1. Ħoll tal-kampjun: ħoll il-kampjun wara l-evaporazzjoni li ddur f'solvent xieraq. Is-solubilità tas-sustanza li għandha tiġi analizzata u r-rekwiżiti tal-kundizzjonijiet tal-analiżi HPLC għandhom jitqiesu meta jintgħażlu solventi.

2. Preparazzjoni ta 'soluzzjoni standard: Jekk tkun meħtieġa analiżi kwantitattiva, is-soluzzjoni standard tal-kompost li għandu jiġi ttestjat tista' tiġi ppreparata għal korrezzjoni u kalkolu sussegwenti tar-riżultati tal-analiżi.

3. Wettaq analiżi HPLC: injetta l-kampjun fis-sistema HPLC u waqqaf kolonna ta' separazzjoni xierqa, fażi mobbli u detector. Skont l-iskop tal-analiżi, agħżel metodi u parametri xierqa, bħar-rata tal-fluss, it-temperatura u l-programm gradjent.

4. Ġbir u analiżi tad-dejta: il-kromatogramma tal-kampjun tinġabar bis-sistema HPLC, u l-kompost fil-mira huwa kkwantifikat jew identifikat skont iż-żona tal-quċċata, il-ħin ta 'żamma jew parametri oħra relatati. Il-metodu tal-kurva standard u l-metodu standard intern jistgħu jintużaw għall-analiżi kwantitattiva.

5. Interpretazzjoni tar-riżultati: Skont ir-riżultati tal-analiżi, il-komposti fil-kampjun ġew evalwati kwalitattivament u kwantitattivament. Skont il-ħtiġijiet, tista 'tiġġenera rapporti jew tirrekordja r-riżultati tal-analiżi.

 

L-applikazzjoni ta 'rotovap fl-analiżi HPLC għandha żewġ tifsiriet prattiċi

 

• Konċentrazzjoni tal-kampjun: F'xi każijiet, il-konċentrazzjoni tal-kampjun li għandu jiġi analizzat tista 'tkun baxxa wisq, għalhekk l-evaporatur rotatorju kimiku jista' jintuża biex jikkonċentra l-kampjun biex tiżdied is-sensittività ta 'skoperta tal-analite fl-HPLC.
• Tneħħija tas-solvent: F'xi kampjuni, is-solventi jistgħu jinterferixxu mal-analiżi HPLC, għalhekk huwa meħtieġ li jitneħħew jew jissostitwixxu s-solventi fil-kampjuni b'solventi adattati għall-HPLC. L-evaporatur rotatorju tal-laboratorju jista 'jgħin biex jitneħħa s-solvent u jittrasforma l-kampjun f'forma adattata għall-analiżi HPLC.

 

Analiżi HPLC uevaporatur li jdurhuma żewġ tekniki komunement użati fl-analiżi kimika, u għandhom xi differenzi u konnessjonijiet fil-prinċipju u l-applikazzjoni.

 

Differenza

 

Prinċipju: HPLC hija bbażata fuq il-prinċipju tal-kromatografija likwida, u s-separazzjoni u l-analiżi kwantitattiva huma realizzati bl-interazzjoni bejn il-fażi stazzjonarja (kolonna) u l-fażi mobbli (solvent). L-evaporatur juża l-prinċipju tat-tisħin u tar-rotazzjoni biex jevapora l-kampjun likwidu malajr u jneħħi s-solvent, sabiex jikkonċentra l-kampjun jew ibiddel l-ambjent tas-solvent tal-kampjun.

Qasam ta' applikazzjoni: HPLC tintuża ħafna fil-kimika, il-farmaċija, l-ambjent u oqsma oħra, u tista 'tintuża għas-separazzjoni, l-identifikazzjoni u l-analiżi kwantitattiva ta' komposti f'taħlitiet kumplessi; L-evaporazzjoni rotatorja tintuża prinċipalment fil-proċess ta 'konċentrazzjoni tal-kampjun, tneħħija tas-solvent u preparazzjoni tal-kampjun, u tintuża komunement f'sintesi organika, estrazzjoni ta' prodotti naturali, preparazzjoni ta 'kampjuni u oqsma oħra.

Veloċità tal-analiżi: L-analiżi HPLC normalment tieħu żmien twil biex tissepara u tiskopri kampjuni, li jistgħu jieħdu diversi minuti sa diversi sigħat; L-unità tal-evaporatur li jdur bil-vakwu tista 'tevapora kampjuni likwidi malajr fi żmien qasir, ġeneralment tieħu biss ftit minuti.

 

Qabbad

 

Trattament tal-kampjun: It-tagħmir tal-evaporatur rotanti ħafna drabi jintuża biex jikkonċentra kampjuni jew ineħħi s-solventi waqt il-preparazzjoni tal-kampjuni biex jagħmel kampjuni adattati għal metodi ta 'analiżi ulterjuri, bħal HPLC. L-effett u l-eżattezza tal-analiżi HPLC jistgħu jittejbu billi tikkonċentra l-kampjun u tneħħi s-solvent permezz ta 'evaporatur li jdur.

Għażla tas-solvent: Fl-analiżi HPLC, l-għażla tas-solvent hija importanti ħafna għall-effett tas-separazzjoni; Il-evaporatur li jdurjista 'jgħin biex jitneħħa s-solvent mill-kampjun u jittrasforma l-kampjun f'forma adattata għall-analiżi HPLC. Għalhekk, l-evaporatur li jdur jista 'jipprovdi kundizzjonijiet ta' solvent sodisfaċenti għall-analiżi HPLC.

 

Aħna nipprovdu rotovap ta 'rfigħ manwali u rotovap ta' rfigħ elettriku, jekk jogħġbok ikkuntattjanasales@achievechem.combiex personalizzati l-magna tal-evaporatur rotanti tiegħek stess.